聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)

1.范圍

本規(guī)范適用于模塊加熱的聚合酶鏈反應(yīng) (PCR)分析儀計(jì)量性能的校準(zhǔn),對(duì)于其他類(lèi)型的PCR儀,可參照本規(guī)范執(zhí)行。

2.引用文件

本規(guī)范引用了下列文件:

GB/T6682—2008 分析實(shí)驗(yàn)室用水國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

YY/T1173—2010 聚合酶鏈反應(yīng)分析儀

凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本規(guī)范;凡是不注日期的引用文件,其最新版本 (包括所有的修改單)適用于本規(guī)范。

聚合酶鏈反應(yīng)分析儀產(chǎn)品細(xì)節(jié)圖

3.術(shù)語(yǔ)

3.1 聚合酶鏈反應(yīng) polymerasechainreaction,PCR [YY/T1173—20103.1]

一種對(duì)特定的 DNA 或 RNA 片段在體外進(jìn)行快速擴(kuò)增的方法,由變性—退火—延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。

3.2 聚合酶鏈反應(yīng)分析儀 polymerasechainreactionanalyzer[YY/T1173—20103.2]

基于PCR (聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)原理,模擬 DNA 或 RNA 的復(fù)制過(guò)程,在模板、

引物、聚合酶等存在的條件下,特異擴(kuò)增已知序列,對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)分析的儀器設(shè)備。

4.概述

聚合酶鏈反應(yīng)分析儀是基于PCR技術(shù)原理,模擬 DNA 或 RNA 的復(fù)制過(guò)程,在模板、引物、聚合酶等存在的條件下,特異擴(kuò)增已知序列,對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)分析的儀器設(shè)備,包括定性PCR儀和定量 PCR 儀兩類(lèi)。定性 PCR 通常由樣品載臺(tái)、熱循環(huán)部件、控制部件和電源部件等部分組成。定量 PCR 儀主要由樣品載臺(tái)、熱循環(huán)部件、控制部件、光學(xué)檢測(cè)部件、電源部件、計(jì)算機(jī)及應(yīng)用軟件等部分組成。

5.計(jì)量特性

計(jì)量特性見(jiàn)表1。

6.校準(zhǔn)條件使用說(shuō)明

儀器使用允許的環(huán)境條件,測(cè)量過(guò)程中應(yīng)測(cè)量和記錄環(huán)境的溫度、相對(duì)濕度。

6.1 校準(zhǔn)設(shè)備及標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

6.1.1 溫度校準(zhǔn)裝置

由若干個(gè) (通常為15個(gè))精密溫度傳感器、數(shù)據(jù)采集分析模塊組成,測(cè)溫范圍(0~120)℃,溫度校準(zhǔn)裝置測(cè)量不確定度≤0.1℃,且需要通過(guò)計(jì)量檢定。

6.1.2 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

校準(zhǔn)時(shí)應(yīng)采用國(guó)內(nèi)外有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),包括:質(zhì)粒 DNA 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、核糖核酸標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),其特性量值 (拷貝數(shù)≥109copies/μL,相對(duì)擴(kuò)展不確定度≤5%)。

6.1.3 電子天平

精度≤0.01mg,且需要通過(guò)計(jì)量檢定。

6.1.4 移液器

規(guī)格:2μL、10μL、100μL、200μL、1000μL,且需要通過(guò)計(jì)量檢定。

以上就是聚合酶鏈反應(yīng)分析儀校準(zhǔn)的相關(guān)內(nèi)容。